Az elegáns reakcióból kiderül. Orvosi enciklopédia

Citokémiai módszerek kémiai és enzimatikus anyagok azonosítása a sejtekben, ehhez színreakciókat alkalmazva. Citokémiai gyógyszerek megőrzik sejtszerkezet, amely lehetővé teszi a sejtek azonosítását és a vizsgált vegyület intracelluláris lokalizációját. Éppen ezért a hematológiában nem a biokémiai, munkaigényes, destruktív sejtszerkezetet részesítik előnyben, és a nagyon heterogén sejtpopulációhoz kötődnek, hanem a citokémiai módszereket.

Citokémia bebizonyította, hogy a morfológiailag azonos sejtek között jelentős kémiai és enzimatikus különbségek vannak.

Glikogén (CHIK reakció) (PAS) - Hotchkiss módszer - Mac Minus

A CHIC reakció elve. A poliszacharidokat egy olyan reakcióval azonosítják, amely oxidálja az alkoholcsoportokat, amelyek aldehidcsoportokká alakulnak, az utóbbiakat pedig a Schiff-reagenssel végzett színreakcióval.

A CHIC reakció reagensei: 1. Rögzítő alkohol-formalin keverék: 9 rész abszolút etilalkohol+1 rész 40% formaldehid; +4°-os hőmérsékleten tárolandó.

2. Perjodsav, 1% vizes oldat. Az oldat színtelen. Tárolja barna üvegben, sötétben, laboratóriumi hőmérsékleten. A megsárgult oldat használhatatlan.

3. Schiff-reagens. Hígítson fel 1 g bázikus fukszint 200 ml desztillált vízben forrásponton. 5 percig keverjük, 50 °C-ra hűtjük, szűrjük és adjunk hozzá 20 ml normált sósav. Hűtsük le 25°-ra, adjunk hozzá 2 g nátrium- vagy kálium-metabiszulfitot, amely teljesen biztosítja az oldatot. Az oldatnak egy napig állnia kell sötét és hideg körülmények között (+4°). Ezután adjunk hozzá 2 g-ot aktív szén, chat 1 percig. és szűrjük.
A kapott szűrlet átlátszó és színtelen. Enyhén sárgás árnyalat megengedett; ha az oldat rózsaszínűvé válik, használhatatlanná válik. Tárolja +4°-os hőmérsékleten, légmentesen lezárt barna üvegben.

4. Zöld fény -1%-os vizes oldat.

5. Diasztázis: nem cseppfolyósított emberi nyál vagy amilolitikus-diasztatikus enzim 0,1%-os oldata fiziológiás sóoldatban.

A CHIC reakció végrehajtásának technikája

1) a kenetek 10 perces rögzítése alkohol és formalin keverékével; öblítés desztillált vízzel;
2) oxidáció 1%-os perjodsav oldattal, 10 perc; öblítés desztillált vízzel;
3) festés Schiff-reagenssel fedett edényben, sötétben és hidegben, 2 órán keresztül; öblítés folyó vízzel;
4) kontrasztfestés 1% zöldfénnyel 1 percig; öblítés folyó vízzel.

Vezérlés hozzárendelve kenetet diasztázzal inkubáltuk, 60 perc. szobahőmérsékleten a glikogén szelektív eltávolítására. Desztillált vízzel történő mosás után a szokásos módszerrel dolgozzuk fel.

A CHIC reakció eredményeinek értékelése

glikogén, bíborvörösre festett piros, szemcsék formájában vagy szétszórtan jelenik meg. Érett kenet granulocitákat használunk a reakció nyomon követésére. A glikogén mellett más szénhidrát anyagok, például mucin, mukoproteinek, cerebrozidok és fibrin is pozitív reakciót adnak. A glikogént ezektől a komponensektől diasztázzal történő előkezeléssel különböztetjük meg, amely után a glikogén már nem festődik.

IN granulociták A glikogén már a promielocita stádiumban diszpergált formában van, és éréskor növekedni kezd. IN normál körülmények között A limfociták negatívak, vagy 20%-uk több kis glikogénszemcsét tartalmazhat. A monociták negatívak vagy finoman szemcsések.

Intenzitás színezés félkvantitatív módon határozzák meg. A reakcióban a PAS glikogénindikátor vagy átlagos reakcióindikátor (Astaldi) formájában tükröződik. A normál glikogénszint 0,10 és 0,30 között van. Jellemzően csak a patológiás limfociták terhelése 3-nál nagyobb.

Ezt a CHIC reakciómódszer jelezte:
a) Az akut leukémia bizonyos citológiai típusainak differenciáldiagnózisa során:
- A mieloblasztok és promyeloidok PHIK-negatívak, vagy gyenge diffúz színt kapnak. Az Auer testek pozitív reakciót adnak, amely a nyállal történő emésztés után gyengül.
- A limfoblasztok akut leukémiában és lymphosarcomában éles CHIC-pozitív reakciót adnak szemcsék vagy nagy glikogénblokkok formájában.
- Az eritroblasztok erythremiában és akut eritroleukémiában élesen pozitív szórt vagy szemcsés reakciót adnak, ellentétben a normál eritroblasztokkal, amelyek PAS-negatívak;
- A monocitoid blastok következetlenül gyengén pozitívak, finom szemcsézettséggel.

b) Krónikus limfatikus leukémia diagnózisának felállítása és a kezelés hatékonyságának ellenőrzése céljából: emelkedett glikogén mutató jelzi súlyos forma betegségek és súlyos prognózis.
A glikogén növekedése patológiás limfocitákban, a leukémiára nem jellemző jelenség, a metabolikus aktivitás növekedésével magyarázható bármilyen típusú limfoid proliferáció esetén.

c) A Gaucher-sejtek akkumulációval történő megkülönböztetése más makrofágoktól.

CHIC reakció)

hisztokémiai módszer glikogén, semleges gliko- és mukoproteinek, szialomukoproteinek és glikolipidek kimutatására, amely az ezekben a vegyületekben található 1,2-glikol-csoportok perjodsavval (vagy sóival) aldehidekké történő oxidációján alapul, melyek kimutatása Schiff reagens.

1. Kis orvosi lexikon. -M.: Orvosi enciklopédia. 1991-96 2. Először is egészségügyi ellátás. - M.: Bolsaya Orosz Enciklopédia. 1994 3. Enciklopédiai szótár orvosi kifejezések. -M.: Szovjet enciklopédia. - 1982-1984.

Nézze meg, mi a „Pas-reaction” más szótárakban:

Schiff (PAS) reakció) teszt, amely lehetővé teszi a glikoproteinek, poliszacharidok, egyes mukopoliszacharidok, glikolipidek és számos zsírsavak. A vizsgált szövetet a Schiff-reagenssel való érintkezés után jóddal kezelik... ... Orvosi kifejezések

CHIC REAKCIÓ, PAS REAKCIÓ- (periodikussav Schiff (PAS) reakció) teszt, amely kimutatja a glikoproteinek, poliszacharidok, egyes mukopoliszacharidok, glikolipidek és számos zsírsav jelenlétét a szövetekben. A vizsgált szövet a Schiff-reagensnek való kitettség után... Szótár az orvostudományban

- (syn. CHIC reakció) hisztokémiai módszer glikogén, semleges glikoproteinek és mukoproteinek, szialomukoproteinek és glikolipidek azonosítására, ezekben a vegyületekben lévő 1,2 glikolcsoportnak perjodsavval (vagy sóival) történő oxidációján alapul. .. Nagy orvosi szótár

Lásd Pas reakciót... Nagy orvosi szótár

Ez a cikk a Nyugat-Szaharai Konfliktus Nyugat-Szahara című sorozat része Történelmi háttér Nyugat-Szahara története Marokkó története Szaharai arab Demokratikus Köztársaság Spanyol ... Wikipédia

I Tüdőgyulladás (pneumonia; görög tüdőgyulladás) fertőző gyulladás tüdőszövet, amely a tüdő minden struktúráját érinti az alveolusok kötelező bevonásával. Nem fertőző gyulladásos folyamatok a tüdőszövetben, amelyek káros... ... Orvosi enciklopédia

Lásd Pas reakciót... Orvosi enciklopédia

- (vascularis stromális dysproteinosisok) dysmetabolikus (dystrophiás) folyamatok, melyeket a fehérjeanyagcsere domináns zavara jellemez, és elsősorban a szervek stromájában fejlődik ki. Hagyományosan a mesenchymalis diszproteinózisokkal együtt, mint... ... Wikipédia

A paecilomycosis a mycosis új nozológiai egysége, amelyet Baker vezetett be 1971-ben a Paecilomyces nemzetséghez tartozó gombák által az emberekben és állatokban okozott károkról szóló rendelkezésre álló jelentések alapján. A mai napig a rendszerszintű... ... Wikipédia kevéssé tanulmányozott típusa

- - 1799. május 26-án született Moszkvában, a Nemetskaya utcában, Skvortsov házában; 1837. január 29-én halt meg Szentpéterváron. Apja felől Puskin egy régi nemesi családhoz tartozott, a genealógiák szerint egy leszármazottból származott „… Nagy életrajzi enciklopédia

A glikogén a sejtek citoplazmájában lokalizálódik és játszik fontos szerepet a sejtek energia-anyagcseréjében. A glikogén citokémiai vizsgálata során elsősorban a PAS reakciót vagy a CHIC reakciót alkalmazzák (a reagensek elnevezése szerint Schiff-jódsav).

Shabadash módszer

A kálium-perjodát hatására a glikogén oxidálódik, és olyan aldehid vegyületek képződnek, amelyek könnyen reagálnak a Schiff-reagenssel (fukszin-kénsav). Azokon a helyeken, ahol a glikogén lokalizálódik, cseresznye-lila szín mutatkozik meg, melynek intenzitása alapján meg lehet ítélni a glikogén mennyiségét a sejtekben.

Eszközök és felszerelések

• 50 ml-es főzőpoharak vagy küvetták.
• Méretezett hengerek.
• Grafikus pipetták.
• 250 ml űrtartalmú lombik.
• Tölcsérek.
• Égők.
• Termosztát.
• Mérleg.

Reagensek

• 0,03 M kálium- vagy nátrium-perjodát oldat: 230 mg perjodátot 100 ml desztillált vízben oldunk. Használat előtt készítse elő.
• Schiff-reagens: 1 g bázikus fukszint feloldunk 200 ml forrásban lévő desztillált vízben. Miközben lehűl, 1 g kálium-metabiszulfitot és 20 ml 1 n-t adunk az oldathoz. sósav oldat. Hagyja egy napig. A teljes színtelenítéshez adjunk hozzá egy összetört karbolén tablettát, hagyjuk állni egy napig, majd szűrjük le. A reagenst sötétben (lehetőleg hidegen) kell tárolni egy jól lezárt tartályban. Több hónapig használható (enyhe vörösség a reagens alkalmatlanságát jelzi).
• Kénes víz: 10 ml 10%-os kálium-metabiszulfit-oldathoz adjunk 200 ml desztillált vizet és 10 ml 1 N. sósav oldat. Használat előtt készítse elő.
• Shabadash reagens: 100 ml etil-alkoholhoz adjunk 1,8 g réz-nitrátot, 0,9 g kalcium-nitrátot és 10 ml formaldehidet.
• 1 n. sósavoldat (82,5 ml tömény sósav fajsúly 1.19 Adjunk hozzá desztillált vizet 1 literhez).
• világoszöld festék (Lichtgrün) 0,1%-os alkoholos oldata.

Festés haladás

• A készítményeket (közvetlenül az elkészítés után) 30 percig Shabadash folyadékban rögzítjük.
• Mossa le kétszer desztillált vízben.
• Merítsük perjodát oldatba 20 percre (sötétben).
• Mossa le háromszor desztillált vízben.
• Öblítse le kénes vízben (1-2 percig).
• Festse meg Schiff-reagenssel 30-40 percig (sötétben).
• Kénes vízben háromszor 3 percig mossuk.
• Mossa háromszor cserélve desztillált vízzel 3 percig.
• Fessük világoszöld festékkel 10-20 másodpercig.
• Mossa le desztillált vízben.

A reakció végrehajtásához célszerű az összes oldatot vegyi főzőpohárba vagy küvettába helyezni, és a gyógyszereket a fenti sorrendben átvinni.

Jelenleg gyárilag gyártott reagensek léteznek a glikogén citokémiai vizsgálatára, amelyek könnyebben használhatók. Sajnos nem mindegyik jó minőségű.

A Shabadash módszer eredménye

A glikogén a készítmény zöld hátterében cseresznye-ibolya színűvé válik.

A glikogén mennyiségét félkvantitatív módszerrel számítják ki, vagy százalékban fejezik ki.

A glikogén mellett pozitív reakciót adhatnak olyan PAS-pozitív anyagok, mint a savas és semleges mukopoliszacharidok, mukoproteinek, glikoproteinek stb. A glikogén könnyen megkülönböztethető más anyagoktól nyál- vagy diasztáz-vizsgálattal.

Nyál teszt

A gyógyszert frissen gyűjtött nyálba helyezzük, és 30 percig termosztátban hagyjuk. Ezután a fenti módszerrel megfestjük glikogénre. A gyógyszerek nyállal történő inkubálása elősegíti a glikogén lebomlását, és a Schiff-reagenssel történő reakció nem eredményez rózsaszín színt.

A glikogén azonosítható úgy is, hogy a keneteket amilázzal (1 ml szűrt amiláz 40 ml fiziológiás oldatban oldjuk) 30 percig termosztátban előinkubáljuk.

A gyakorlatban általában nem végeznek nyállal végzett tesztet, így a PAS-pozitív anyag általában az összes poliszacharidot jelenti, és nem csak a glikogént.

A Shabadash módszer normál értékei

A perifériás vérkenetekben a glikogén a neutrofilek citoplazmájában (bőséges kis szemcsék formájában), a limfociták citoplazmájában (kis számú nagy szemcsék formájában) és a vérlemezkékben (egyetlen nagy szemcsék formájában) található. . A csontvelő aspirátumban a glikogént a neutrofilekben mutatják ki változó mértékbenérettség, limfociták és megakariociták.

A PAS-pozitív anyag koncentrációja granulocitopoiesis sejtek növekszik a sejtek érésével. A citoplazma diffúz festődése általában a granulocita sorozat legfiatalabb sejtjeire jellemző (mieloblasztok, promyelociták, mielociták). Az érett neutrofilek sok PAS-pozitív anyagot tartalmaznak kis szemcsék formájában, amelyek olyan szorosan vannak csomagolva, hogy a citoplazmatikus háttér rosszul megkülönböztethető. U egészséges emberek intenzív színűek száma neutrofilek vér (+++) 2-12%, átlagos színintenzitás (++) - 72-90%, gyengén színezett (+) - 4-18%. Az MCV 1,71-2,04. Egyes szerzők többet adnak magas értékek Glikogén MCC egészséges emberek neutrofil sejtjeiben (2,485 - 2,555). Idős és szenilis embereknél a glikogén MCV jelentős csökkenését figyelték meg (1,93-2,03).

Érett állapotban eozinofilekÉs bazofilek PAS-pozitív anyag található alábbiak szerint: specifikus szemcsék festetlenek maradnak, és élesen kiemelkednek a citoplazma diffúz festődésének hátteréből.

IN monociták a glikogén gyakrabban észlelhető finom poros szemcsésség formájában a világos rózsaszín diffúz festődés hátterében.

IN limfociták Az egészséges emberek vérében a glikogén kis számú granulátum formájában a sejtek 8,1-12,7% -ában található. Egyes szerzők 2 és 30% közötti számokat adnak meg.

Általában 3-10% eritroid sejtek mukopoliszacharidokat tartalmaznak.

IN megakariociták a csontvelői glikogén granulátum formájában található (egyszeritől 30-50-ig), amelyek a vérlemezkék felhalmozódására emlékeztetnek. Egészséges emberekben a glikogén-pozitív megakariociták száma 58,45-65,55%. IN vérlemezkék A PAS-pozitív anyag kis, szétszórt szemcsék formájában mutatható ki a sejt perifériáján, vagy intenzív, központi helyen elhelyezkedő folt formájában.

A Shabadash módszer klinikai jelentősége

A neutrofilek glikogéntartalmának növekedése figyelhető meg különböző gyulladásos folyamatokban, erythremiában, diabetes mellitusban, csökkenést figyelnek meg az agranulocitózisban, sugárbetegség, krónikus mieloid leukémia, különösen a folyamat előrehaladtával.

A glikogén-pozitív limfociták számának növekedése (akár 70-80%) jellemző a limfoproliferatív betegségekre, különösen a krónikus limfocitás leukémiára.

Krónikus mieloid leukémiában a granulociták glikogéntartalma a normához képest körülbelül 2-szeresére csökken, bár annak biokémiai módszerekkel meghatározott összmennyisége a leukocitózis miatt akár meg is emelkedhet.

Trombocitopéniás purpurával és tüneti thrombocytopeniával a megakariociták glikogén-pozitív formáinak száma jelentősen csökken a splenectomia után, és a normál értékekre emelkedik.

Akut leukémiában a glikogén kimutatható blasztsejtekben: akut myeloid leukémiában a citoplazmában finom szemcsésség vagy gyenge diffúz festődés formájában, egyes blasztokban a PAS reakció negatív. Akut promielocitás leukémiában a citoplazma fényes diffúz festődése figyelhető meg. Monoblasztokban a reakció lehet negatív, gyengén pozitív diffúz vagy diffúz szemcsés formában (ha a reakcióterméket a citoplazma széle mentén elszórt kis vagy közepes méretű szemcsék formájában mutatják ki, diffúz háttér előtt) . Az erythromyelosisban a glikogén granulátum formájában található az eritroblasztokban, és változó intenzitású diffúz festődés formájában - a normoblasztokban. A limfoblasztok glikogént tartalmaznak a citoplazmában közepes és nagy szemcsék formájában, amelyek peremszerűen vannak elrendezve a sejtmag körül, néha tömbökké egyesülve, festetlen háttéren. Az ilyen típusú PAS-reakciót mutató sejtek száma nagymértékben változik az akut limfoblaszt leukémia különböző eseteiben.

A glikogén citokémiai vizsgálata nem csak vér- és csontvelőkenetben végezhető el. Például megvizsgálhatja a hüvelyi hám keneteit, és a vizsgálat eredményei alapján megítélheti funkcionális állapot petefészkek. Normális esetben a nők sejtjeiben sok glikogén található, míg a glikogén kimerülése a petefészkek működési zavarára utal.

A daganatokban a glikogén mennyisége változó: az érett jóindulatú daganatok sok glikogént tartalmaznak, míg az éretlen rákos daganatokban a glikogén mennyisége erősen csökken. A tumorsejtek glikogénszintjének csökkenése valószínűleg a daganat rosszindulatú daganatának indikátoraként használható.

Mikrofotók a CHIC reakcióról:

Irodalom:

• Klinikai kézikönyv laboratóriumi módszerek kutatási szerk. E. A. Kost. Moszkva "Orvostudomány" 1975
• Kézikönyv "Laboratóriumi kutatási módszerek a klinikán" szerk. prof. V.V. Menshikova Moszkva "Orvostudomány" 1987
• L. V. Kozlovskaya, A. Yu. Oktatóanyag a klinikai laboratóriumi kutatási módszerekről. Moszkva, Orvostudomány, 1985
• V.G. Palagnyuk - Akut leukémia citokémiai diagnosztikája.
• A vérrendszer vizsgálata a klinikai gyakorlatban. Szerk. G. I. Kozints és V. A. Makarov. - M.: Triada-X, 1997.

A citokémiai vizsgálatok lehetővé teszik az enzimaktivitás, tartalom vizsgálatát különféle anyagok vérsejtekben, csontvelőben, nyirokcsomókban és más szövetekben.

A hematológiában alkalmazott modern citokémiai kutatási módszerek a sejtelemek morfológiai értékelésével kombinálva a differenciálódás irányának vizsgálatára szolgálnak. vérképző sejtek. Azonosításuk alapja az egyes sejttípusokra jellemző anyagcsere jellemzők. A citokémiai kutatási módszereknek számos előnye van: egyszerűen kivitelezhetőek, reprodukálhatók, nem igényelnek bonyolult, drága berendezéseket, informatívak. A citokémiai reakciókat perifériás vérkenetekben, csontvelő-pontokban, vénás vér leukokoncentrátumában, agy-gerincvelői folyadékban, nyirokcsomók aspirátumaiban, lépben, különböző helyek leukémiás infiltrátumaiban hajtják végre. A citokémiai vizsgálatok elvégzésekor figyelembe kell venni, hogy a készítmények minősége ill jó technika A kenetek elkészítése kritikus.

Kenetek készítése
A vér- és csontvelőkenetet legjobban közvetlenül olyan anyagból készíteni, amelyet véralvadásgátló szerek hozzáadása nélkül nyernek.

Ha ez nem lehetséges, készítsen kenetet véralvadásgátlókkal stabilizált sejtszuszpenzióból vagy enyhe centrifugálással kapott leukémia koncentrátumból. Súlyos leukopenia esetén tanácsos citokémiai vizsgálatokat végezni a vénás vér leukémiás koncentrátumából nyert készítményekben.

Az elkészítést követően a keneteket gyorsan levegőn kell szárítani, amíg a nedves fény eltűnik, így elkerülhető a gyűrődés és a rögzítés közbeni lemosódás az üvegről. A perifériás vérből és csontvelőből készített keneteket legfeljebb egy napig ajánlatos tárolni, mivel a legtöbb intracelluláris enzim aktivitása csökken. A készítményeket levegőn történő szárítás után azonnal rögzítjük.

Citokémiai reakciók eredményeinek értékelése
A legtöbb esetben elegendő meghatározni a citokémiai reakció jellegét (gyenge, közepes, intenzív), jelezve a pozitívan reagáló sejtek százalékos arányát.

A PAS reakció értékelésekor a pozitív anyag eloszlásának jellege (diffúz, diffúz-szemcsés, szemcsés) nagyobb diagnosztikai értékkel bír, mint annak mérése. teljes szám(például akut leukémia esetén).

Egyes esetekben félkvantitatív módszert alkalmaznak tetszőleges egységek számlálásával vagy az átlagos citokémiai együttható kiszámításával. Elve a színintenzitás és a pozitív szemcsék számának értékelése 100 sejt elemzésekor:
0 - a citoplazmatikus festődés hiánya negatív reakciónak minősül (0);
+ - gyengén diffúz festődés vagy egyetlen szemcsék a citoplazmában;
++ - a citoplazma diffúz festődése, közepes mennyiségű granulátum;
+++ - a citoplazma intenzív festődése, számos granulátum kitölti az egész sejtet.

A színintenzitás értékelése után kiszámítjuk a tetszőleges egységek számát vagy az átlagos citokémiai együtthatót.
A hagyományos mértékegységek (уе) számítása a Kaplow-módszer szerint:

Ue = 3xC + 2xB + A.

Az átlagos citokémiai együttható kiszámítása:

Átlagos citokémiai együttható = (3xC + 2xB + A)/100,

ahol A a gyengén pozitív reakciót mutató sejtek száma; B - mérsékelten pozitív reakciójú sejtek száma; C a kifejezett reakciót mutató sejtek száma.

Ebben az esetben a reakcióaktivitás mutatója tetszőleges egységekben 0 és 300 között, az átlagos citokémiai együttható pedig 0 és 3 között lehet.

Mieloperoxidáz
A mieloperoxidáz túlnyomórészt a granulociták citoplazmájában található specifikus azurofil granulátumokban lokalizálódik, és a mieloid sejtek markereként szolgál. A sejtekben a mieloperoxidáz részt vesz a toxikus hidrogén-peroxid elpusztításában. A citokémiai reakciókban az enzimaktivitást a kromogének (benzidin, o-dianizidin stb.) oxidációja határozza meg. A mieloperoxidázt a granulocita sejtekben mutatják ki, kezdve a mieloblaszttal. Az enzimaktivitás a sejtek érésével nő. Az egészséges emberek szegmentált neutrofiljeiben a mieloperoxidáz magas aktivitása észlelhető, amelyet a sejtekben granulátum formájában tartalmaznak, amelyek kitöltik a citoplazmát.

A legmagasabb enzimaktivitás az érett eozinofilekben figyelhető meg. A bazofil promyelocitákban és mielocitákban a mieloperoxidáz aktivitás általában magas, de amint érett sejtekké differenciálódnak, az enzimaktivitás csökken. Az érett bazofilek szinte negatívak lehetnek erre a tulajdonságra. Gyengén pozitív reakció a mieloperoxidázra a monociták változó százalékában, néhány szétszórt granulátum formájában. Az eritrokariocitákban, limfocitákban, bazofilekben és megakariocitákban a mieloperoxidáz aktivitás nem mutatható ki.

Az egészséges emberek vérében a neutrofilek 3-16%-a erősen pozitívan, 60-90%-a pozitívan, a többi gyengén pozitívan festődik. A neutrofilek átlagos citokémiai együtthatója egészséges emberekből 2,56±0,33.

A reakciót elsősorban az akut leukémia diagnosztizálására használják. Akut myeloblastos leukémiában a tumorsejtek enzimaktivitása a mérsékelttől a kifejezettig változik a blasztos differenciálódás mértékétől függően. Így alacsony differenciálódási fokú akut myeloblastos leukémiában (FAB besorolás szerint Mt) az MPO-pozitív blasztok száma kicsi (nem haladja meg a 10%-ot), az enzimaktivitás bennük alacsony. Ugyanakkor akut promielocitás leukémiában a myeloperoxidáz a blastsejtek közel 100%-ában kimutatható, és aktivitása megegyezik az érett neutrofilek aktivitásával.

Akut monoblasztikus leukémiában a myeloperoxidázra adott reakció a tumorsejtekben gyenge, akut limfoblaszt leukémiában negatív. A citokémiai reakciók értékelésére szolgáló pontos kvantitatív módszerek hiánya nem teszi lehetővé azok alkalmazását a blastsejtek differenciálódási fokának ellenőrzésére, és így az akut leukémia pontosabb differenciáldiagnózisára. Így egyik vagy másik citokémiai reakció határozza meg a blastsejtek lineáris irányát, nem pedig a differenciálódás mértékét.

Lipidek
A hematopoietikus sejtekben a lipidek finoman diszpergált képződmények formájában diszpergálódnak, amelyek fénymikroszkópban különösebb festés nélkül megkülönböztethetetlenek. Stabil és jól reprodukálható eredményeket kapunk a vérképző sejtek vizsgálatához, ha a módszert Szudán fekete B-vel alkalmazzuk.

A lipidek szinte minden leukociában megtalálhatók, a limfociták kivételével. A lipidek nagy része azonban a granulocita sorozat sejtjeivel van kapcsolatban. Részei a neutrofil granulociták és eozinofilek specifikus szemcsésségének, és felhalmozódnak a sejtek érésekor. A mieloblasztok általában csekély mennyiségű granulátumot tartalmaznak a perinukleáris zónában, a mielocitákban és a metamielocitákban a szudanofil szemcsék tartalma magas; Az érett neutrofilekben a lipidek kitöltik a teljes citoplazmát.

Az eozinofil érésének minden szakaszában a lipidek a specifikus szemcsék perifériáján találhatók, festetlen vagy enyhén festett központi zónával. A legtöbb éretlen bazofil pozitív reakciót ad a sejtek érésével, lipidtartalmuk csökken. Az érett bazofilekben a reakció változó - gyengén pozitívtól negatívig.

Normál értékek: egészséges emberekben a neutrofilek többsége (69-80%) intenzíven, 18-36%-a közepesen, 10%-a gyengén festődött.

PAS reakció
A PAS-reakció mechanizmusa glikolcsoportok vagy amino- vagy alkil-amino-származékaik perjodsavval aldehidekké történő oxidációján alapul. Az aldehidcsoportok reakcióba lépnek a Schiff-reagenssel, és vörös terméket képeznek. A mukopoliszacharidok (glikozaminoglikánok) a granulocita sorozat minden morfológiailag azonosítható sejtjében kimutathatók. A PAS-pozitív anyag koncentrációja a granulocitopoiesis sejtekben a sejtek érésével nő. A citoplazma diffúz festődése általában a granulocita sorozat legfiatalabb sejtjeire jellemző (mieloblasztok, promyelociták, mielociták). Az érett neutrofilek sok PAS-pozitív anyagot tartalmaznak kis szemcsék formájában, amelyek olyan szorosan vannak csomagolva, hogy a citoplazmatikus háttér rosszul megkülönböztethető. Az érett eozinofilekben és bazofilekben a PAS-pozitív anyag a következőképpen helyezkedik el: a specifikus szemcsék festetlenek maradnak, és élesen kiemelkednek a citoplazma diffúz festődésének hátterében.

Monocitákban a PAS-pozitív anyag gyakran finom porszerű szemcsék formájában mutatható ki a halvány rózsaszín diffúz festődés hátterében.

A limfocitákban a mukopoliszacharidok koncentrációja alacsonyabb, mint a granulocitákban. Normális esetben a perifériás vér limfocitáinak 10-40%-a tartalmaz PAS-pozitív anyagot granulátum formájában a sejtmag körül, a sejtek 1-2%-ában a szemcsék intenzíven festődhetnek és nagy blokkokat képezhetnek. Normál értékek: a neutrofilek 95-100%-ában a PAS reakció diffúz formában mutatható ki, az átlagos cisztokémiai együttható 2,09-2,99, a limfociták 2-33%-a tartalmaz PAS-pozitív anyagot granulált formában, az átlagos cisztokémiai együttható 0. 02-0,52. A mieloperoxidázra és a nem specifikus észterázra adott reakcióval együtt a PAS reakció az egyik fő citokémiai módszer az akut leukémia differenciáldiagnózisában.

Az akut myeloblastos leukémia diagnosztizálása során a blastsejtek lehetnek PAS-negatívak, vagy gyengén diffúz citoplazmatikus festődést észlelnek. A citoplazma fényes diffúz festődése csak akut promielocitás leukémia esetén figyelhető meg.

Monoblasztokban a reakció lehet negatív, gyengén pozitív diffúz vagy diffúz szemcsés formában (ha a reakcióterméket a citoplazma széle mentén elszórt kis vagy közepes méretű szemcsék formájában mutatják ki, diffúz háttér előtt) . Ugyanakkor akut limfoblasztos leukémiában a blastok glikogént tartalmaznak a citoplazmában közepes és nagy szemcsék formájában, amelyek peremszerűen vannak elrendezve a sejtmag körül, néha blokkokba egyesülve. Az ilyen típusú PAS-reakciót mutató sejtek száma nagymértékben változik az akut limfoblaszt leukémia különböző eseteiben.

Nem specifikus észterázok
A nem specifikus észterázok a lizoszómális enzimek heterogén csoportja, amelyek különböznek szubsztrátspecifitásban, valamint az aktivátorok és inhibitorok hatásában. Ez alapján alakultak ki különféle technikák az észterázok azonosítása a fő limfocita populációk potenciális markereiként. A hematológiában leggyakrabban az α-naftil-acetát-észterázt, a klór-acetát-észterázt és a savas α-naftil-acetát-észterázt határozzák meg.

Az A-naftil-acetát-észteráz a myeloid sorozat összes sejtjében megtalálható, a mieloblaszttól kezdve. Aktív az eozinofilekben, anélkül, hogy bármilyen kapcsolat lenne a specifikus szemcsézettségükkel kis mennyiségben limfociták, eritrokariociták, megakariociták és vérlemezkék. A legintenzívebb reakciót a monociták és a makrofágok adják. A monocita sejtekben a nem specifikus észteráz aktivitását a nátrium-fluorid könnyen gátolja, a granulocitákban azonban nem szuppresszálja. Ez a jelenség lehetővé teszi a mononukleáris fagocitarendszer sejtjeinek megkülönböztetését más hematopoietikus csírák sejtjétől, amelyek nem specifikus észteráz aktivitással rendelkeznek. A naftil-AB-O-klór-acetát-észteráz aktivitása a granulocita sejtekben expresszálódik, és hiányzik a monocita és limfocita sorozat sejtelemeiben. A savas α-naftil-acetát-észterázt a T-limfocita differenciálódási folyamat korai szakaszában detektálják, ahol a citoplazmában gócos foltként lokalizálódik.

A leukémiás monocita prekurzorok azonosítására a nem specifikus észteráz aktivitás meghatározását használják. Ezek a sejtek nagy nem specifikus észteráz aktivitást mutatnak a butirát, acetát és AS-D-acetát szubsztrátokkal, ezt az aktivitást nagymértékben gátolja a nátrium-fluorid. A naftil-AB-B-klór-acetát-észterázzal szembeni reakciók a granulocita differenciálódás azonosításának megbízhatósága szempontjából összehasonlíthatók a peroxidáz reakcióval. Az a-naftil-acetát-észterázra adott reakció a legmegbízhatóbb a leukémia monoblasztos és monocitás típusainak azonosítására. Akut myelomonoblastos leukémia esetén a klór-acetát-észteráz és az α-naftil-acetát-észteráz jelenlétére különböző színezékekkel kettős festés alkalmazása javasolt.

foszfatázok
A savas és lúgos foszfatázok olyan enzimek, amelyek közös tulajdon- az a képesség, hogy foszfátot szabadítanak fel alkoholból és fenolos foszfono-észterekből savas vagy lúgos pH-jú környezetben. A foszfatázok citokémiai kimutatása fénymikroszkóppal azon alapul, hogy azokon a helyeken, ahol a szubsztrát hidrolízise megtörténik, oldhatatlan színes csapadék képződik. A foszfatáz aktivitás meghatározásának legelterjedtebb módszere az azo-kapcsolási módszer, amely naftol-foszfátot vagy naftolszármazékot tartalmazó szubsztrátumok felhasználását jelenti. Különféle módszerek különböznek a rögzítés részleteiben, a naftolszármazékok megválasztásában, de ezek lényegében ugyanazt az eredményt adják, minimális eltéréssel az érzékenységben és a szemcsés szín eloszlásában a pozitívan reagáló sejtekben.

Alkáli foszfatáz
Az alkalikus foszfatáz aktivitása csak a granulocita sorozat érett sejtjeiben, főként a neutrofilekben rejlik. Alkalmanként az eozinofilekben a citoplazma háttérfestése van, de nem specifikus szemcsék. A bazofilek, limfociták, monociták, eritrociták és vérlemezkék nem tartalmaznak alkalikus foszfatázt, sem normál, sem patológiás körülmények között.

Az alkalikus foszfatáz aktivitási szintjei nagymértékben változnak a különböző körülmények között. Az alkalikus foszfatáz aktivitás meghatározását a krónikus mieloid leukémia más mieloproliferatív betegségektől és reaktív változásoktól való megkülönböztetésére használják. Az alkalikus foszfatáz aktivitás fokozódik polycythemia vera, idiopathiás myelofibrosis esetén, bakteriális fertőzésekés élesen csökken a krónikus mieloid leukémia.

Alacsony alkalikus foszfatáz szint szinte mindig megtalálható Ph-pozitív krónikus mieloid leukémiában, valamint Ph-negatív juvenilis krónikus myeloid leukémiában. Csak hemolitikus és vashiányos vérszegénység vagy egyes vírusos betegségek mutatnak viszonylag alacsony átlagos cisztokémiai együtthatót az alkalikus foszfatázra. Krónikus mieloid leukémiában szenvedő betegeknél a remisszió alatt az alkalikus foszfatáz aktivitása normális lehet, vagy akár meg is emelkedhet.

Savas foszfatáz
A savas foszfatáz egy lizoszómális enzim, amely a legtöbb maggal rendelkező vérsejt citoplazmájában található. A savas foszfatáz aktivitása a plazmasejtekben, megakariocitákban, vérlemezkékben, monocitákban és makrofágokban, granulocita prekurzorokban a legmagasabb. Ahogy a neutrofil és eozinofil sorozat sejtjei érnek, az enzimaktivitás csökken. A savas foszfatáz elsősorban az elsődleges granulátumokban lokalizálódik, a másodlagos granulátumokban hiányzik. Az érett neutrofilek és eozinofilek alacsony enzimaktivitással rendelkeznek, vagy hiányoznak. A limfocitákban a savas foszfatáz aktivitása nagyon változó.

T-sejtes akut limfoblasztos leukémiában, plazmacitómában és szőrös sejtes leukémiában pozitív festődés jelenik meg a plazmasejtekben, a T-limfocitákban és különösen a blastsejtekben. A limfociták savas foszfatáz aktivitásának csökkenését krónikus limfoblasztos leukémiában és non-Hodgkin-malignus limfómákban, valamint a fertőző mononukleózis növekedését figyelték meg. A reakcióterméket finom poros szemcsék vagy fokális foltok formájában mutatják ki a limfociták citoplazmájában. A savas foszfatáz aktivitás meghatározása fontos a szőrös sejtes leukémia diagnosztizálásában, amelyben a tartarát-rezisztens savas foszfatáz kimutatható a sejtekben.

Festés szideroblasztokhoz
A szideroblasztok és sziderociták normoblasztok (eritroblasztok) és eritrociták, amelyek nem hemoglobin vasat tartalmaznak a citoplazmában granulátum formájában, poroszkékkel reagálva megfestve. Ha a szabad vasszemcsék nagyszámúak, durvák és a mag körül elrendezve, gyűrűt alkotnak, az ilyen sejteket gyűrűs sideroblasztoknak nevezzük. A sziderociták tartalma a perifériás vérben nem haladja meg az 1,1% -ot (0,60-0,04%), a csontvelőben - 0,2-2,1% (0,09-0,90%). A csontvelő sideroblaszt tartalma 23,7±2,4%.

A vasvegyületek általában nem mutathatók ki leukocitákban, míg az erythrokaryocytákban kimutatásuk informatív a nem hatékony eritropoézis megerősítéséhez és a myelodyspathiás szindróma egyes változatainak diagnosztizálásához. Mielodiszpátiás szindrómában az eritroblasztokba belépő vasat nem használják fel a hemoglobin szintézisére, és az eritrokariocitákban (sideroblasztokban) és a csontvelői makrofágokban lerakódik hemosiderin vagy ferritin formájában.

A csontvelőben található sideroblasztok vizsgálata azt mutatja hasznos információkat hogy felmérje a szervezetben a vas felhalmozódásának megfelelőségét. A vasraktárak kimerülése vashiányos vérszegénységben fordul elő, és a sideroblasztok számának csökkenésével jár. Túlzott felhalmozódás figyelhető meg idiopátiás és szerzett hemochromatosisban, krónikus hemolitikus anémiában, talaszémiában és myelodyspathiás szindrómában, ami a sideroblasztok számának növekedéséhez vezet. Amikor a myelodyspathiás szindróma olyan változatát diagnosztizálják, mint a refrakter anaemia gyűrű alakú sideroblasztokkal, fémjel több mint 15%-ban gyűrű alakú sideroblasztok jelenléte a csontvelőben.

A citokémiai reakciók jelentősége az onkohematológiában
A citokémiai módszereket elsősorban a hemoblasztózisok diagnosztizálására alkalmazzák. A citokémiai módszerek (lipidek, PAS reakció, a-naftil-acetát-észteráz) standard panelje a legtöbb esetben elegendő a tumorsejtek lineáris azonosságának azonosításához.

A citokémiai reakciókat a következő célokra használják:
opció megállapítása akut leukémiaés krónikus mieloblaszt leukémia blast krízise;
idiopátiás myelofibrosis (szubleukémiás myelosis) és krónikus mieloblaszt leukémia differenciáldiagnosztikája;
hajsejtes leukémia és lép limfóma diagnosztizálása folyamat limfociták segítségével;
a leukémia sejtek metabolikus jellemzőinek azonosítása.

A granulocita blasztok citokémiai markerei a myelodyspatikus szindróma, a lipidek és az AS-D-klóracetát-észteráz. Ezen enzimek tartalma a mieloblasztokban nagyon változó. Egyes esetekben a felsorolt ​​markerek közül egy vagy kettő (általában lipidek) azonosítható. Éppen ezért, hogy elkerüljük a hibás következtetést egy megkérdőjelezhető eredmény megszerzésekor, két reakciót kell végrehajtani. Az AS-D-klór-acetát-észteráz aktivitása szignifikánsan alacsonyabb, mint a myelodyspathiás szindróma aktivitása. ezért ennek az enzimnek a meghatározása kevésbé diagnosztikus értékű. A myelodyspathiás szindróma aktivitása 15 év alatti gyermekeknél és 60 év felettieknél alacsonyabb, mint a középkorúakban. A monoblasztok meghatározásához fontos a nem specifikus észteráz mérése, amelyet a nátrium-fluorid gátol. A limfoblasztokra a myelodyspathiás szindrómára adott negatív reakció és granulált formában a pozitív PAS-reakció jellemző.

(szin. CHIC reakció)
hisztokémiai módszer glikogén, semleges gliko- és mukoproteinek, szialomukoproteinek és glikolipidek kimutatására, amely az ezekben a vegyületekben található 1,2-glikol-csoportok perjodsavval (vagy sóival) aldehidekké történő oxidációján alapul, melyek kimutatása Schiff reagens.

Érték megtekintése Pas-reakció más szótárakban

Reakció— - szembenállás a társadalmi haladással.
Politikai szótár

Körkörös reakció- - általános mechanizmus, amely hozzájárul a spontán formák kialakulásához és fejlődéséhez tömeges viselkedés(D.V. Olshansky, 425. o.)
Politikai szótár

Reakció- reakciók, g. (latin reactio) (könyv). 1. csak egységek A politika, egy állampolitikai rezsim, amely visszaadja és megvédi a régi rendet a forradalmár ellen harcolva.......
Ushakov magyarázó szótára

Reakció- gyors áresés az előző után
növekedés.
Közgazdasági szótár

Reakciójavaslatok— Az ösztönzők változása következtében megnövekedett termelékenység; főként a strukturális kiigazítás eredményeként megvalósuló piaci liberalizáció kapcsán tárgyalt először.........
Közgazdasági szótár

Reakció, árfolyamesés— Az értékpapírok árfolyamának csökkenése az árak hosszan tartó emelkedése után, valószínűleg nyereségszerzés vagy kedvezőtlen változások következtében. Lásd még a korrekciót.
Közgazdasági szótár

Értékesítési válasz funkció — -
prognózis valószínű
értékesítési volumen egy bizonyos időszak alatt a különböző szinteken egy vagy több elem költségeit
összetett
marketing.
Közgazdasági szótár

Reakció— Az uralkodó piaci trend megfordulása a túlzott eladások következtében a hanyatló piacon (amikor egyes vevőket vonz az alacsony...
Közgazdasági szótár

Abeleva-Tatarinova reakció- (G.I. Abelev, született 1928-ban, szovjet immunológus; Yu. S. Tatarinov, született 1928-ban, szovjet biokémikus) lásd: Alfa-fetoprotein teszt.
Nagy orvosi szótár

Adamkiewicz-reakció- (A. Adamkiewicz, 1850-1921, osztrák patológus; Adamkiewicz-Hopkins-Kohl reakció szinonimája) szín kvalitatív reakció triptofánon és triptofán tartalmú fehérjéken, ibolya-kék alapon.......
Nagy orvosi szótár

Adamkiewicz-Hopkins-Kohl reakció- (A. Adamkiewicz, 1850-1921, osztrák patológus; G. Hopkins, 1861-1947, angol biokémikus; L. Cole, született 1903-ban, francia patológus) lásd Adamkiewicz reakcióját.
Nagy orvosi szótár

Adaptív válasz— lásd: Adaptív reakció.
Nagy orvosi szótár

Allergiás reakció — köznév klinikai megnyilvánulásai túlérzékenység testet az allergénnel szemben.
Nagy orvosi szótár

Késleltetett allergiás reakció— (syn. kithergic response) A. r., amely 24-48 órán belül alakul ki egy adott allergénnel való érintkezést követően; előfordulásakor A. r. h. azaz a főszerep a......
Nagy orvosi szótár

Azonnali típusú allergiás reakció- (syn. kimergiás reakció) AR, 15-20 perc múlva fejlődik ki. meghatározott allergénnel való érintkezés után, pl. anafilaxiás sokkkal; előfordulásakor A. r. n. T.........
Nagy orvosi szótár

Allergiás reakció kereszt- A. r. keresztreagáló (közönséges) antigénekre.
Nagy orvosi szótár

Allergoid reakció— (nrk) lásd Anafilaktoid reakció.
Nagy orvosi szótár

Anamnesztikus reakció- a szervezet immunválasza egy antigén ismételt bejuttatására, amelyet szignifikánsan magasabb antitest-titer jellemez rövid határidők a megjelenésük összehasonlítva......
Nagy orvosi szótár

Anafilaktoid reakció— (anafilaxia + görög eidos típus; szinonimája: allergoid reakció nrk, anafilatoxikus reakció, parahypergia jelensége) - nem specifikus allergiás reakció, jellemzi......
Nagy orvosi szótár

Anafilaxiás reakció– lásd Anafilaktoid reakció.
Nagy orvosi szótár

Antabuse-alkohol reakció— (szin. teturam-alkohol reakció) vegetatív-szomatikus tünetek együttese (bőrhiperémia, majd sápadtság, tachycardia, légszomj, az artériás...
Nagy orvosi szótár

Arisztovszkij-Fanconi reakció- (történelmi; V. M. Arisztovszkij, 1882-1950, szovjet mikrobiológus és immunológus; G. Fanconi, született 1892-ben, svájci gyermekorvos) allergiás intradermális teszt elölt streptococcusok szuszpenziójával a ...... ..
Nagy orvosi szótár

Agglutinációs reakció— (RA) – azonosítási módszer és számszerűsítése Ag és At, szabad szemmel látható agglomerátumképző képességük alapján. A fertőző betegségek osztályán. betegségek............
Mikrobiológiai szótár

Agglutinációs reakció üvegen— - expressz módszer az RA diagnosztizálására, amelyben az immunrendszert és a corpuscularis Ag-t összekeverik egy tiszta tárgylemez vagy speciális (gyűrűs) üveg felületén.
Mikrobiológiai szótár

Agglutinációs gátlási reakció— az Ag-agglutináció gátlása homológ Abs-ok által az Abs-nak a teszt Ag-kkel való előzetes érintkezése eredményeként, amelyek általában haptén jellegűek. Az Ag-ek versengése a paratop Abs-okkal szemben
Mikrobiológiai szótár

Agglutinációs-lízis reakció- lásd Leptospirosis.
Mikrobiológiai szótár

Reakció- (szleng) - itt: gyors áresés egy korábbi emelkedés után.
Jogi szótár

Antiglobulin reakció- lásd Coombs reakciója.
Mikrobiológiai szótár

Ascoli reakció- termoimmunoprecipitációs reakció, amelyet a lépfene Ag kimutatására használnak elhullott állatok tetemében, karbunkulusok elhalt szövetében, nyers bőrökben és kész......
Mikrobiológiai szótár

Bakterolízis reakció— teljes baktériumok kölcsönhatási reakciója. sejteket, ellenanyagokat és komplementet, aminek eredményeként a baktériumok lízise következik be. A spirochetosisban lévő immunrendszerek litikus tulajdonságokkal rendelkeznek......
Mikrobiológiai szótár